摘要：从冷藏鸭汁中分离筛选出乳酸菌，测定其生理生化特性及其分子鉴定。
果表明，从冷冻酱鸭中选出两种优良的乳酸菌，命名为J1和J2。细菌的形态，生理和生化特性和16S rDNA序列和系统发生树的分析同源性结合，J1和J2是副干酪乳杆菌亚种，其中有一个更好的发酵能力产酸，冷凝器价格大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有强效抑制作用，能够承受极端的pH环境。
键词：鸭酱;乳酸菌;分离; CLC识别号：7 Q939.11文献编号：A文章编号：0439-8114（2015）03-0676-04DOI：10.14088 / j.cnki.issn0439-8114.2015 .03.044Identification和隔离的生物学特性在低香肠乳酸细菌températureCHEN胡娟，周砚青1，李京云1，张宇1王万shen1，樊瑜霞，Zhao1常，于晓婕，袁鲁LU2（1.科学大学生活，河南师范大学，新乡453007，河南，中国;周口周口科技厅466000中国河南）摘要：研究的目的是隔离和过滤精细物质乳酸细菌鸭酱在低温和每分子和生化测试标识两个乳酸细菌菌株分离，并命名为J1和J2，具有的形态，生理和生化细菌分析，序列同源性d 16S rRNA和进化树分析表明，J1和J2是副干酪乳杆菌J1和J2的亚种有能力生产发酵产酸，抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的一个很好的能力，以及两个可容忍极端的pH环境。别：益生菌乳酸菌，其营养成分直奔主机的电流，促进人与动物的生长，调节胃肠道和泌尿生殖道的正常菌群，增强免疫力和保持平衡微生态。能[1]广泛用于医药，食品和饲料以及环境保护领域。酸菌广泛存在于自然界，并有来自人类和动物，植物，发酵食物，饮料，甚至地板的肠道乳酸的细菌。些研究者已经报道肠内容[2]，发酵乳制品[3，4]，腌泡菜[5，6]，所述冷藏鲜肉[7]为基础的产品发酵肉制品[8]。离出各种高质量的乳酸菌。的肉，鸭子是当前治疗的原料，其可以或可以直接发酵成鸭菜，炖鸭，鸭酱，鸭虾油等[9，10]，每一种赋予特定的味道。
酸菌产生香味物质，例如在发酵过程中乙醛和丁二酮，从而使发酵产品具有特定的风味，和发酵鸭可能是因为乳酸细菌产生的某些物质调味，赋予它们独特的风味。期翱[9]，分离鸭板17株发酵的建昌鉴定通过形态学，生理和生化特性，并筛选耐受适于发酵鸭盐的菌株。研究的目的是隔离乳酸菌冷冻调味汁鸭，通过它们的形态，生理和生化特性和遗传学鉴定，并进一步通过酸生产测试探索它们的特性发酵，低pH耐受性试验和抑菌试验。
料和方法材料样品采集鸭酱是从温州酱板鸭店，新乡市，河南省，放在无菌袋并放置在凉爽购买，报实验室，并在4冷藏保存℃下介质MRS明胶的液化介质，用于产生葡萄糖酸生产培养基葡糖酸介质，脱脂奶粉培养基，制备根据[11]所述的方法。离方法和乳酸菌的筛选应在2℃保存在冰箱中2周，然后加入1g的混合物在无菌解剖切割并充分粉碎。加9毫升无菌盐水，摇匀，然后稀释10-4，10-5和10-6，将100μl每个接种在含有CaCO 3和培养的1.5％的培养箱中的MRS培养基上在37°C下保持48小时。出具有透明圆的单个菌落并连续纯化和纯化三次，然后储存在4℃的冰箱中备用。
据文献乳酸菌的生理生化鉴定[11]，通过革兰氏染色，接触反应，运动试验，液化试验明胶，葡萄糖测试气体生产和葡糖酸盐，发酵试验甘油，山梨糖醇发酵试验用淀粉乳酸发酵试验和蔗糖发酵试验鉴定分离出的乳酸菌[11]。酸菌的分子鉴定活化的菌株用于提取由CTAB的菌株的总DNA，和的16S rRNA，使用基因组DNA作为模板进行扩增。引物是由潮报道的引物[12] 27F：AGAGTTTGATCCTGGCTCAG和1541R：AAGGAGGTGATCCAGCCGCA以扩增其16S rRNA和所述引物由华达生物技术有限公司合成PCR反应体系为25微升，其中包括10×缓冲液EasyTaq 2.5微升，2.5微升的dNTPs，EasyTaq 0.25微升，1组微升模板DNA，1个微升上游引物下游引物和1微升无菌去离子水16.75μL。
应条件：预变性94℃3分钟; 94℃30秒，55℃30秒，72℃1分钟，35个循环;最后一次延伸在72°C 10分钟;养护4℃将其通过琼脂糖凝胶电泳在1％检测，并且约500bp的片段通过凝胶回收并用生物修复工程有限公司回收，回收的产物是送到生物工程（上海）有限公司公司完成了测序，测序结果在GenBank中NCBI数据库进行同源性比较，与系统发育树，与MEGA5.05作进一步的分析构建。定乳酸菌以产生酸的乳酸菌产生酸的能力的能力是用于筛选优良发酵酸奶的菌株的一个重要指标。
奶的酸度通常表示为在0.1摩尔/必要L氢氧化钠的毫升数来中和牛奶100毫升，称为T°，即所谓的酸度酸度滴定。测试的菌株接种到MRS培养基中，在37℃培养过夜并活化3代以完全激活实验菌株。活化的菌株接种到含有10％的试管脱脂乳培养基中，在3％的播种率，并在37℃下培养在凝乳和时间的凝乳被记录下来。乳后，将其置于4℃的冰箱中24小时，测量每个管的pH和滴定酸度。株重复3次。
pH用一个PHS-320型测量酸度计和酸度用NaOH 0.1摩尔/ L的标准溶液进行滴定，以度Gilner的表达（°T）。
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